Современные методы забора крови у сельскохозяйственных животных

В ветеринарных лабораториях уточняется диагноз, определяется эффективность обработок, выявляются скрытые патологические процессы… Первым делом отбирается образец (биопроба). Речь идет о крови, продуктах жизнедеятельности (моче и кале), секрете молочной железы, поте, содержимом желудка, рубца и кишечника, тканях, кусочках органов. Чаще исследуется кровь. Именно о ней мы сегодня и поговорим. Вы узнаете, как получают такой материал у разных видов животных, доставляют его в лабораторию.

В силу нестабильности химического состава крови для получения достоверных результатов нужно соблюдать правила отбора и хранения биологического материала.

Нюансы отбора материала

При отборе крови учитывается суточная динамика и соблюдаются правила антисептики. Кровь следует отбирать перед кормлением. Если же животное получило корм, то надо выждать не менее пяти часов. В крови, отобранной раньше, концентрация белка, глюкозы, липидов, лейкоцитов и др. выше физиологической нормы. Пример: норматив по глюкозе в сыворотке крови у КРС – от 2,2 до 3,5 ммоль/л, но если отобрать кровь через час после кормления, значение показателя увеличивается как минимум в два раза.

Один из факторов, определяющих концентрацию минералов, эритроцитов, – время суток. По этой причине материал повторно отбирается в одни и те же часы.

В некоторых случаях взятие пробы невозможно без нарушения целостности тканей. В подобных ситуациях обязательна асептика-антисептика. Лучший антисептик – 70-градусный этиловый спирт. Правда, ветеринары пользуются им, когда есть необходимость во введении туберкулина. Также эффективен спирт-эфир. В крайнем случае пользуются 3-процентной карболовой кислотой.

В стране имеется широкий ассортимент антисептических средств для обработки места прокола (для взятия крови или инъекции). Основа львиной части антисептиков представлена этиловым спиртом, используемым вкупе со вспомогательными бактерицидными компонентами, усиливающими действие.

При выборе препарата нужно руководствоваться составом, ценой и удобством применения. Себя зарекомендовали антисептические спиртовые средства, используемые в виде аэрозолей.

Большое значение имеет анализ крови и лекарства. Материал для анализа отбирается до лечебных мероприятий. Но в любом случае берутся в учет лекарства, которые получало животное. Так, по причине внутривенного введения средства иногда уменьшается количество эритроцитов, гемоглобина… Использование вакцины вызывает лейкоцитоз.

Чем быстрее кровь окажется в пробирке, тем меньше вероятность получения искаженных результатов. На билирубине, витамине В2 отрицательно сказывается свет. Поэтому пользуются светонепроницаемыми пакетами. Допускается временное хранение материала в ящике. При риске разрушения вещества под влиянием кислорода кровь отбирают в пробирку с вазелиновым маслом: так получаемая сыворотка находится под слоем масла и недоступна для воздуха.

Моменты, учитываемые при выборе места отбора крови:

• видовая принадлежность животного;
• размер животного;
• анатомия сосудов (кровь берется из самых доступных вен);
• опыт, личные предпочтения специалиста.

Возможные ошибки

При выполнении стандартной методики взятия крови из яремной вены велика вероятность попадания материала на человека и окружающие предметы. Если животное заражено, возникает риск распространения инфекции. Открытый способ занимает много времени, требует подготовки и предельной аккуратности.

При нарушении правил асептики и техники забора крови полученный образец может не соответствовать требованиям, у коровы могут возникать осложнения в виде абсцессов, гематом. Не рекомендуется форсировать забор во избежание частичного гемолиза кровяных клеток.

Взятие крови у коровы

У КРС кровь берется из яремной, хвостовой и молочной вен.

Отбор пробы из яремной вены – наиболее популярная процедура, но требует определенной сноровки при нахождении места прокола и при фиксации животного. Корове необходимо тщательно фиксировать голову и шею, что сказывается на доступе к яремной вене.

В плане безопасности кровь лучше брать из хвостовой вены. Правда, в этом случае приходится иметь дело с медленным кровотоком. Такая проблема решается посредством так называемых «пробирок с вакуумом», более тщательной очистки места прокола и опыта. Допустимо использовать «вакуум» шприца: после прокола кожи и сосуда к игле присоединяем шприц (со стабилизатором или без) и набираем кровь. Стоит помнить, что форсированное насасывание крови в шприц может привести к частичному разрушению (гемолизу) клеток крови, что отразится на корректности результатов. И все же мы рекомендуем практиковать именно этот способ отбора крови.

Техника отбора крови из хвостовой вены:

1. Животное фиксируют в станке.
2. Очищают область у корня хвоста.
3. Иглу берут в одну руку, второй рукой удерживают хвост и поднимают его так, чтобы визуально можно было контролировать место введения иглы.
4. Игла вводится на глубину примерно 1 см перпендикулярно нижней поверхности хвоста, по центру. Лучше прокол делать на расстоянии 8-12 см от основания хвоста. Можно использовать ориентир «ширина кисти»: от основания хвоста отступить 1,0-1,5 ширины кисти. В этой области хвостовая вена имеет наибольший диаметр (около 0,5-0,8 см) и вероятность попасть в нее максимальна.

Молочные вены определяются как тяжи на нижнебоковой поверхности живота с двух сторон, идущие от вымени вперед. Они очень хорошо видны и доступны, что создает псевдо-эффект банальности процедуры. На самом деле при проколе молочных вен самая главная проблема – безопасность! Во-первых, действия происходят вблизи тазовых конечностей. Во-вторых, кожа, покрывающая сосуд, достаточно толстая, поэтому необходимо точно рассчитать силу удара при проколе. Автор получал травмы рук при таком взятии крови у коровы.

Подготовка животного

Забор крови у коров проводят для исследования ее биохимического состава, исключения инфекционных заболеваний или подтверждения предполагаемого диагноза. Венозная кровь необходима для проведения анализа на лейкоз, бруцеллез, туберкулез. Чтобы взять материал у коровы, не причинив вреда здоровью животного, необходимо правильно подготовиться к процедуре. Оптимальное время для забора – утренние часы перед первым кормлением. После приема пищи не рекомендуется брать кровь на анализ в течение 5 часов.

Место для взятия пробы освобождают от волосяного покрова и, при необходимости, фиксируют скотину, после чего участок обрабатывают антисептиком. Для дезинфекции подходит 70 % раствор этилового спирта, 1 % спиртовой раствор салициловой кислоты, 5 % спиртовой раствор йода.

Методики, не требующие принудительной фиксации положения тела, легче переносятся животными. Стресс от проведенной процедуры может привести к снижению удоя. Не рекомендуется брать кровь у самок за 3 недели до отела и в течение 3 недель после родов.

Мнение эксперта

Заречный Максим Валерьевич

Агроном с 12-ти летним стажем. Наш лучший дачный эксперт.

Задать вопрос

Чтобы не возникало осложнений, необходимо соблюдать технику взятия крови, выбирая менее травматичный для коровы и безопасный для человека вариант.

Взятие крови у свиней

Лучшее место для процедуры – сосуды ушных раковин, кончик хвоста, глазной синус, передняя полая вена.

Многие специалисты отсекают кончик хвоста, что ведет к гемолизу. При этом стерильность пробы оставляет желать лучшего. Картина ухудшается кровотечением и возникающим каннибализмом.

Эффективнее брать материал из передней полой вены, но для этого нужен определенный опыт. К тому же, такой способ является трудоемким.

Удобнее материал брать из глазного синуса. Стратегия взятия биопробы:

• Фиксируют свинью за верхнюю челюсть с помощью петли. Поросят допускается фиксировать в спинном положении, дополнительно ограничить подвижность головы рукой.
• Кровь берется при помощи вакуумного шприца. Допускается использовать обыкновенную иглу и пробирку.
• Иглу вводится во внутренний угол глаза под третье веко, скосом к кости (не к глазному яблоку!). При этом манипулируют канюлей так, чтобы оттеснить глазное яблоко иглой (условно ориентируясь острием на противоположный локтевой бугор).

С опытом легко определяется необходимая глубина введения иглы: 2-3 см – у взрослых свиней, 0,5-1,0 см – у поросят. Начинающим ветврачам можно иглу вводить до ощущения упора в кость.

• Если все сделано правильно, то при отводе иглы от кости кровь должна начать течь сама. Как правило, на пробирка объемом 20 мл наполняется за полторы минуты (быстрее при визге животного).
• Капающая кровь из места прокола убираются тампоном.

Особенности вакуумного забора крови

Использование вакуумных систем имеет существенное преимущество, так как кровь после забора попадает сразу же в специальную пробирку, в результате чего не происходит контакта ветеринарного персонала с взятым образцом.

Такие системы состоят из вакуумного шприца, который служит контейнером, и специальной иглы. Соединение с антикоагулянтом осуществляется внутри вакуумного контейнера.

Если рассматривать преимущества вакуумного забора крови, то можно выделить следующее:

• на протяжении 2-х часов есть возможность сделать забор образцов для исследования у 200 животных;
• не требуется перед началом процедуры фиксировать животное в неподвижном состоянии;
• на всех этапах забора не происходит непосредственного контакта ветеринарного врача с кровью;
• так как кровь не контактирует с предметами из окружающей среды, то риск распространения инфекции сводится к нулю;
• животное практически не испытывает стресс во время проведения процедуры.

В результате того, что крупный рогатый скот не испытывает стрессов, у коров надой не уменьшается.

Важно! Благодаря использованию вакуумных систем можно получить стерильный образец крови.

Небольшое количество крови получают у кроликов и мор­ских свинок из вен уха, у мышей и крыс – из вен хвоста, а большие количества – из сердца. В особых случаях прибегают к полному, или тотальному, обескровливанию, после которого животное погибает.

В табл. 12.3 приведены данные о максимальных количествах крови и интервалах времени, через которые можно брать кровь у животных.

Таблица 12.3. Схема взятия крови от животных-доноров

Для пункции сердца животных фиксируют к доске брюш­ком кверху. Шерсть в области груди тщательно выстригают, кожу обрабатывают спиртовым раствором йода и после этого приступают к пункции сердца, имеющей некоторые различия в зависимости от вида животного.

Пункция сердца у кроликов. Определяют II пальцем, обрабо­танным спиртом и смазанным спиртовым раствором йода, сердечный толчок, т.е. точку наиболее сильно выраженной пульсации сердца. Обычно она прощупывается в третьем меж-реберье. Прокол грудной клетки делают в области сердечного толчка на расстоянии 2–4 мм от левого края грудины, иглу ведут в направлении к средней линии на глубину 2–2,5 см. При попадании иглы в полость сердца рука, в которой нахо­дится шприц, начинает ощущать ритмичные толчки, связанные с пульсацией сердца и приподнимающие иглу. Поршень шпри­ца легко выдвигается наружу и в цилиндре его тотчас появля­ется кровь. Взятие крови должно производиться по возмож­ности быстрее во избежание ее свертывания. По этой же при­чине шприц и иглу рекомендуется промывать перед опытом стерильным раствором цитрата или оксалата натрия. Взяв не­обходимое количество крови, быстрым движением, без рывка вынимают иглу и на место укола накладывают ватный тампон, пропитанный спиртовым раствором йода. Животному подкож­но вводят подогретый до температуры тела стерильный изото­нический раствор хлорида натрия или глюкозу в количестве, равном двойному объему взятой крови. Пункцией сердца мож­но получить у кролика 25–30 мл крови.

Пункция сердца у морских свинок. Кончиками III–IV пальцев левой руки нащупывают сердечный толчок, в направлении которого вертикально на глубину 1,5–2 см вкалывают иглу, отступя 1–2 мм от левого края грудины. У морских свинок можно получить таким образом 10–12 мл крови.

Пункция сердца у крыс. Как и в предыдущих случаях, паль-паторно определяют место сердечного толчка. На 1 см выше от установленной точки и на 1–2 мм левее от края грудины делают прокол на глубину 1,5–2 см, держа иглу вертикально. Одномоментно у крыс можно получить 6–8 мл крови.

Тотальное обескровливание кролика. Вскрывают одну из сон­ных артерий, расположенных по обе стороны трахеи. Для по­лучения стерильной крови руки оперируемого должны быть тщательно вымыты и обработаны спиртом или спиртовым рас­твором йода, все инструменты предварительно необходимо простерилизовать.

Подготовленного для кровопускания кролика привязывают к станку брюшком кверху, фиксируя голову кольцом к штати­ву. Шерсть на шее тщательно выстригают, кожу дезинфициру­ют. К носу животного прикладывают кусочек ваты, смоченной эфиром. После того как наступит состояние наркоза, скальпе­лем делают разрез по средней линии шеи и разводят края раны пинцетом. Сонные артерии проходят по бокам трахеи в ярем­ном желобке между веной и нервом. Сверху артерия прикрыта грудиноподьязычной и грудинощитовидной мышцами. Поэто­му для обнаружения нервно-сосудистого пучка эти мышцы разделяют тупым концом скальпеля или браншами пинцета. Артерию освобождают от окружающей соединительной ткани и подводят под нее две лигатуры. Ближайшую к головке лига туру завязывают двойным узлом, позади второй лигатуры

Рис. 12.9. Введение канюли в артерию

при обескровли­вании животных.

на расстоянии 0,3–0,5 см накладывают пеан. Между лигатурой и пеаном маленькими остроконечными ножницами делают про­дольный разрез сосуда длиной не более 1,5–2 мм, вставляя в него канюлю (стеклянную трубочку с оттянутым капилляром, кончик которой скошен и хорошо оплавлен). Кончик встав­ленной канюли укрепляют второй лигатурой. После этого под резиновую трубку, надетую на расширенную часть канюли, подставляют пробирку или флакон и снимают пеан с артерии, чтобы кровь могла вытекать свободно (рис. 12.9). Обескровли­вание морских свинок производят так же, как и кроликов.

Взятие крови из вены уха кролика. Для получения крови из краевой вены нужно прежде всего вызвать гиперемию уха, потирая его ладонями рук и слегка ударяя кончиками пальцев. Затем вдоль наружного края уха удаляют пушок и протирают этот участок уха ватой, увлажненной 70% спиртом. Если в результате всех перечисленных процедур сосуды не инъециру­ются, ухо смазывают ксилолом или толуолом. После того как сосуды набухнут и четко обозначатся на поверхности ушной раковины, наружную поверхность ее покрывают тонким слоем жидкого парафина (во избежание быстрого свертывания крови) и делают прокол вены.

Для получения небольшого количества крови (менее 1 мл) прокалывают одну из небольших периферических ветвей, а для получения больших объемов крови (5–10 мл) вскрывают кра­евую вену уха. С этой целью иглу шприца вводят в вену почти параллельно поверхности уха, чтобы не повредить противопо­ложную стенку вены. При проколе вены иглой шприца кровь, как правило, выходит отдельными каплями с большими интер­валами и кровотечение прекращается быстро. Для того чтобы вызвать обильное кровотечение, нужно сделать ранку с рваны­ми краями. С этой целью пользуются обломком тонкого ка­пилляра пастеровской пипетки. При таком способе прокола из уха кролика получают до 30 мл крови.

После взятия крови к проколу вены прикладывают на 2– 3 мин кусочек сухой стерильной ваты, не нажимая сильно на стенку сосуда, так как при этом кровотечение может усилиться. Если кровотечение долго не прекращается, хорошие результаты дает нанесение на ранку нескольких капель перекиси водорода.

Взятие крови из вен у морских свинок, крыс и мышей. У мор­ских свинок кровь в количестве 0,3–0,5 мл получают после нанесения насечек на край уха или прокола мягких подушек лапы.

У белых крыс и мышей для получения 1–3 капель крови приходится прибегать к ампутации кончика хвоста после про­должительного прогревания его в воде температуры 45–50°С или протирания ксилолом. Взяв кровь, рану прижигают пере­кисью водорода.

В.М.Концова (1968) предложила способ, позволяющий по­лучить у крыс 0,5–1 мл крови из венозного сплетения, лежа­щего в орбите, позади глазного яблока. Взятие крови произво­дят стеклянной пипеткой с оттянутым капилляром (наружный диаметр 0,6 мл), острие которого сточено под углом 45°.

Животное берут I и II пальцами левой руки со стороны спины за шею и слегка сдавливают с боков, вызывая легкое выпячивание глаз. Вращательным движением пипетки делают прокол конъюнктивального мешка в медиальном углу глаза между глазным яблоком и орбитой. После прокола пипетку ведут в направлении гортани на глубину 4–5 мм. Попадание в венозное сплетение сопровождается заполнением капилляра пипетки кровью.

Когда нужно сдавать анализ Бруцеллез IgG (кач.)?

1. Профессиональный осмотр лиц, чья работа связана с сельскохозяйственными животными;
2. Подозрение на бруцеллез;
3. Дифференциальный диагноз состояний, вызывающих лихорадку, увеличение лимфатических узлов, печени и селезенки;
4. Дифференциальный диагноз поражения костно-мышечного аппарата;
5. Выявление причин поражения нервной системы;
6. Поражение нескольких систем организма (сердечно-сосудистой, мочеполовой, нервной и других) без видимых причин;
7. Исследование перед вакцинацией от бруцеллеза лиц из группы риска заражения (ветеринары, сотрудники микробиологических лабораторий и другие).